组织固定的方法有物理固定和化学固定两类。物理固定可采用空气干燥(血涂片)、骤(在液氮中迅速冷冻)或微波固定等。化学固定有浸润法(immersion method)和灌流法 ertusion method)等。灌流法适用于动物实验中对缺氧敏感的器官,如神经系统和胃肠等取材。

(一)浸润法

      将标本放入固定液中进行固定,称为浸润固定法,是最常用的组织固定方法,临床病理、尸检、科研标本制作均使用此法,一次要处理许多组织样品时也多用此法。预先需估计固定的用量，并在取材前配好固定液,分装于小容器内,在容器上标记组别和取材时间,容器内成入记录组织类型的纸条,以便包埋时辨认。固定液的用量应是样品体积的10倍以上,以保组织充分固定。固定时间可根据所选固定液和组织类型而定。若进行酶组织化学染色，应在4℃短时间固定，固定时间过长会导致酶活性减弱，甚至消失。

 (二)蒸汽固定法

      利用固定液(如甲醛、多聚甲醛、锇酸等)加热后产生的蒸汽对组织进行固定的方法,称为蒸汽固定。常用于组织中的可溶性物质、血液或细胞涂片的固定。

(三)注射、灌注固定法

      该法是经血管途径,把固定液灌注到需要固定的器官内，使活的细胞在原位及时迅速固定,取下组织后再浸入相同的固定液内继续固定。灌流固定大动物时多采用输液方式,将固定液从一侧颈总动脉或股动脉或者左心室输入，从静脉或者右心房放血,输入固定液与放血同时进行。固定液的输入量因个体不同而异。小动物(如大鼠和小鼠)多采用心脏灌流固定。动物在乙醚吸入深度麻醉的情况下,打开胸腔,纵向切开心包膜,用静脉输液针从左心室(心尖处)刺入,针尖刺入后,随即将纱线扎紧固定,勿使其移动,再将右心耳剪开放血。在灌注固定液前,先用含抗凝剂的37℃生理盐水灌流,冲洗血管内的血液,防止血液凝固阻塞血管。抗凝剂常用肝素,剂量为40mg/L冲洗液。肝脏颜色由鲜红变为浅白色时，即可灌流固定液。灌注速度为5~10ml/min,应在30分钟内结束灌注并取材,而后将组织浸入相同的固定液中1~3小时。灌流固定对组织结构和酶活性保存较好。

(四)微波固定法

      将组织块浸入固定液中,置于医用微波仪内,经微波作用加快组织固定的方法,称为微波固定法。微波固定的组织具有核膜清晰、染色均匀及组织结构收缩小等优点。